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中国 药 典 2015年版 门 冬 酰 胺 酶 （欧 文 )
200单 位 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 。照 门 冬 酰 胺 酶 （埃 希 ）项 图中主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
下 的 方 法 检 查 ，纯 度 应 不 低 于 95. 0% 。
时 间 （分 钟 ） 流 动 相 A(% ) 流 动 相 B(% )
干 燥 失 重 取 本 品 O .lg ，置 105X：干 燥 至 恒 重 ，减 失 重 量 0 25 75
不 得 过 5 .0 % (通 则 0831) 。 0
60 0 100
异 常 毒 性 取 本 品 ，加 氣 化 钠 注 射液溶解并稀释 制成每lml 70 25 100
中含10 000单位的 溶 液 ，依 法 检 查 (通 则 1141),应 符合 规 定 。 72 25
82 75
细 苗 内 毒 素 取 本 品 ，依 法 检 查 ( 通 则 1143〉，每 1 单位门 75
冬 酰 胺 酶 (埃 希 ）中 含 内 毒 素 的 量 应 小 于 0. 015EU。
【检 査 】 黢 碱 度 取 本 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 毎 lm l
无 苗 取 本 品 ，用 适 宜 溶 剂 溶 解 后 ，经 薄 膜 过 滤 法 处 理 ， 中 含 1 0 m g 的 溶 液 ，依 法 测 定 （通 则 0 6 3 1 )，p H 值 应 为
依 法 检 査 （通 则 1101)，应 符 合 规 定 。 6. 5? 7. 5 。
其他除可见异物允许有少量纤维状不溶物和略带乳光 溶 液 的 澄 清 度 与 颜 色 取 本 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每
外 ，其 他 应 符 合 注 射 剂 项 下 有 关 的 各 项 规 定 （通 则 0102) 。 l m l 中 含 5 m g 的 溶 液 ，依 法 测 定 （通 则 0901第 一 法 和 通 则
0902第 一 法 ），溶 液 应 澄 清 无 色 。
【效 价 测 定 】 取 本 品 5 支 ，分 别 加 适 量 0. lm o l/L 磷 酸盐
缓 冲 液 （pH 8 .0 )溶 解 ，并 全 量 转 移 至 同 一 量 瓶 中 ，用上述 缓 冲 纯 度 取 本 品 适 量 ，加 流 动 相 溶 解 并 稀 释 制 成 毎 l m l 中
液 稀 释 至 刻 度 ，摇 匀 。精 密 量 取 适 量 ，用 上 述 缓 冲 液 定 量 稀 释 约 含 2 m g 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 。 照 分 子 排 阻 色 谱 法
制 成 每 l m l 中 约 含 5 单 位 的 溶 液 ，照 门 冬 酰 胺 酶 （埃 希 〉项下 ( 通 则 0514)测 定 ,用 适 合 分 离 分 子 量 为 10 000? 500 000球状
的 方 法 测 定 酶 活 力 ，计 算 ，即 得 。 蛋 白 的 色 谱 用 亲 水 改 性 硅 胶 为 填 充 剂 ；以 0. lm o l/L 磷酸 盐缓
冲 液 (pH 6. 7 )(取 磷 酸 二 氢 钠 6. 0g、磷 酸 氢 二 钠 20. 2g，加水
【类别 】 同 门 冬 酰 胺 酶 ( 埃 希 ）。 900ml,用 磷 酸 或 氢 氧 化 钠 溶 液 调 节 p H 值 至 6 .7 ，加 水 至
【规格 】 （1)5000单 位 （2 )1 万单位 1000ml)为 流 动 相 ；流 速 为 每 分 钟 0. 6 m l;检 测 波 长 为 280nm。
【贮 藏 】 遮 光 ，密 闭 ，冷 处 保 存 。 取 20^1注人液相色谱仪，记录色谱图,按峰面积归一化法计算主峰
相对百分含量,应 不 得 低 于 97.0% 。
门冬酰胺酶( 欧文）
干 燥 失 重 取 本 品 O .lg ,置 105C干 燥 3 小 时 ，减失重量
M e n d o n g x ia n ，a n m e i ( O u w e n ) 不 得 过 5 .0 % ( 通 则 0831) 。
Asparaginase (E rw inia) 重 金 属 取 本 品 0 .5 g ,依 法 检 査 （通 则 0821第 二 法 ）>含
重金属不得过百万分之二十。
本 品 系 自 欧 文 菌 （Erwinia carotovora ) 中 提 取 制 备 的 具
有酰胺基水解作用的酶。每 lm g 蛋 白 含 门冬 酰胺酶活力不 异 常 毒 性 取 本 品 ，照 注 射 用 门 冬 酰 胺 酶 （欧 文 ）项 下 的
得 低 于 250单 位 。 方 法 检 査 ，应 符 合 规 定 。
【制 法 要 求 】 本 品 所 用 的 生 产 菌 种 来 源 途 径 应 经 国 家 有 细 菌 内 毒 棄 取 本 品 ，依 法 检 查 (通 则 1143)，每 1 单位门
关 部 门 批 准 并 应 符 合 国 家 有 关 的 管 理 规 范 ,生 产 过 程 应 符 合 冬 酰 胺 酶 ( 欧 文 ）中 含 内 毒 素 的 量 应 小 于 0. 015EU。
现行 版 《药 品 生 产 质 量 管 理 规 范 》的 要 求 。
降 压 物 质 取 本 品 ，依 法 检 查 ( 通 则 1145) ，剂 量按猫体重
【性 状 】 本 品 为 白 色 结 晶 性 粉 末 ;无 臭 。 每 1kg注 射 1 万 单 位 ，应 符 合 规 定 。
本 品 在 水 中 易 溶 ，在 乙 醇 和 乙 醚 中 不 溶 。
【鉴 别 】 （1)取 本 品 5mg，加 水 l m l 使 溶 解 ，加 20% 氢氧 【效 价 测 定 】 酶 活 力 对 照 品 溶 液 的 制 备 取 经 105X；
化 钠 溶 液 5ml，摇 匀 ，再 加 1 % 硫 酸 铜 溶 液 1 滴 ，摇 匀 ，溶 液 应 干 燥 至 恒 重 的 硫 酸 铵 适 量 , 精 密 称 定 ，加 水 溶 解 并 定 量 稀 释 制
显蓝紫色。 成 0. 0015mol/L的 溶 液 。
(2 )取 本 品 适 量 ，加 流 动 相 A 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中约
含 l m g 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 ；另 取 门 冬 酰 胺 酶 （欧 文 ）对 供 试 品 溶 液 的 制 备 取 本 品 约 O .lg ，精 密 称 定 ,加 磷 酸 盐
照 品 ，加 流 动 相 A 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 约 含 l m g 的溶 缓 冲 液 ( 取 0. lm o l/ L 磷 酸 氢 二 钠 溶 液 适 量 ，用 0. lm o l/L 磷酸
液 ，作 为 对 照 品 溶 液 。照 高 效 液 相 色 谱 法 (通 则 0512)测定,用 二 氢 钠 溶 液 调 节 p H 值 至 8. 0 )溶 解 并 定 量 稀 释 制 成 每 l m l 中
八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 为 填 充 剂 （4. 6mmX 250mm), 以 0. 05% 约 含 5单位的溶液。
三 氟 醋 酸 溶 液 为 流 动 相 A ，以 三 氟 醋 酸 -40%乙 腈 溶 液 （0.5 :
1000)为 流 动 相 B ;柱 温 为 40X：; 流 速 为 每 分 钟 1ml;检 测 波 长 测 定 法 取 试 管 3 支 （H cm X 1.2cm) ，各 加 人 用 上 述 磷
为 220nm;按 下 表 进 行 梯 度 洗 脱 。取 供 试 品 溶 液 和 对 照 品 溶 酸 盐 缓 冲 液 配 制 的 0. 33% 门 冬 酰 胺 溶 液 1.9 m l,于 37*C水浴
液 各 20fxl,分 别 注 人 液 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 ，供 试 品 溶 液 色 谱 中 预 热 3 分 钟 ，分 别 于 第 一 管 （《。）中 加 人 25% 三 氣 醋 酸 溶 液
0. 5ml，第 2、3 管 ( t ) 中 各 精 密 加 人 供 试 品 溶 液 0. l m l , 置 37X：
水 浴 中 ，准 确 反 应 15分 钟 , 立 即 于 第 一 管 (t。）中 精 密 加人供试
品 溶 液 0 .1 m l,第 2、3 管 U ) 中 各 加 人 25% 三 氣 醋 酸 溶 液
0. 5ml，摇 匀 ，分 别 作 为 空 白 反 应 液 （《。）和 反 应 液 U )。精 密 量
取 t? 、t 和 对 照 品 溶 液 各 0. 5m l,置 试 管 中 ，各 加 水 7. 0 m l与碘
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