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注 射 用 门 冬 酰 胺 酶 （埃 希 )                                       中 国 爾 典 2015年嚴

中 约 含 l m g 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 ；另 取 门 冬 酰 胺 酶 （埃           lm l中约含5 单位的溶液。
希 ）对 照 品 ，加 流 动 相 A 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 约 含                     测 定 法 取 试 管 3 支 （14Cm X l . 2cm),各 加 人 用 上 述 磷
l m g 的 溶 液 ，作 为 对 照 品 溶 液 。 照 高 效 液 相 色 谱 法 （通剩
0 5 1 2 ) 测 定 ，用 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 为 填 充 剂 （4. 6m m X        酸 盐 缓 冲 液 配 制 的 0. 33% 门 冬 酰 胺 溶 液 1 .9 m l,于 371C水浴
2 5 0 m m ) ; 以 0. 05 % 三 氟 醋 酸 溶 液 为 流 动 相 A ，以 三 氟 醋       中 预 热 3 分 钟 ，分 别 于 第 一 管 U ) 中 加 人 25% 三 氯 醋 酸 溶 液
酸 - 4 0 % 乙腈 溶 液 （0. 5 : 1 0 0 0 ) 为 流 动 相 B ; 柱 温 为 40*C ;  0. 5ml，第 2 、3 管 ⑴ 中 各 精 密 加 人 供 试 品 溶 液 0. l m l ,置 37T
流 速 为 每 分 钟 1ml;检 测 波 长 为 220nm;按下表进行梯度洗                     水 浴 中 ，准 确 反 应 15分 钟 ，立 即 于 第 一 管 U ) 中 精 密加 入供 试
脱 。取 供 试 品 溶 液 和 对 照 品 溶 液 各 20(^1，分 别 注 人 液 相 色             品 溶 液 0 .1 m l,第 2、3 管 （《) 中 各 加 人 25% 三 氣 醋 酸 溶 液
谱 仪 ，记 录 色 谱 图 ，供 试 品 溶 液 色 谱 图 中 主 峰 的 保 留 时 间              0 .5 m l,摇 匀 ，分 别 作 为 空 白 反 应 液 （t。）和 反 应 液 （i )。精 密 量
应与对照品溶液主峰的保留时间一致。                                            取 h 、t 和 对 照 品 溶 液 各 0. 5m l,置 试 管 中 ，各 加 水 7. 0 m l与碘
                                                             化 汞 钾 溶 液 (取 碘 化 汞 23g、碘 化 钾 16g,加 水 至 100ml,临用前
      时间（分钟）   流动相A (% )   流动相                               与 20% 氢 氧 化 钠 溶 液 等 体 积 混 合 ）1. 0m l,混 匀 ，另 取 试 管 一
            0          25         75                         支 ，加 水 7. 5 m l与 碘 化 汞 钾 溶 液 1. 0 m l作 为 空 白 对 照 管 ，室温
           60           0        100                         放 置 15分 钟 ，照 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 （通 则 0401)，在 450nra
           70           0        100                         的 波 长 处 分 别 测 定 fo 吸 光 度 A 。、t 吸 光 度 A , 和 对 照 品 溶 液 吸
           72         25          75                         光 度 A s , 以 A , 的 平 均 值 ，按 下 式 计 算 ：
           82         25          75
                                                                       效双形价「（（单早 位仅 //mmgg)) = (戌 —AAS° X) X称5样X 量稀 （释mg倍) 紀 ^
       【检 査 】 酸 碱 度 取 本 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每 lm l          式 中 5 为反应常数；
中 含 lO m g 的 溶 液 ，依 法 测 定 （通 则 0 6 3 1 )，p H 值 应 为
6. 5? 7. 5。                                                            F 为对照品溶液浓度的校正值。
                                                                    效 价 单 位 定 义 ：在 上 述 条 件 下 ，一 个 门 冬 酰 胺 酶 单 位 相 当
       溶 液 的 澄 清 度 与 颜 色 取 本 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每          于每分钟分解门冬酰胺产生Ipm ol氨所需的酶量。
l m l 中 含 5 m g 的 溶 液 ，依 法 测 定 （通 则 09 0 1 第 一 法 和 通 则              蛋 白 质 含 量 取 本 品 约 20mg，精 密 称 定 ，照 蛋 白 质 含 量
0902第 一 法 ），溶 液 应 澄 清 无 色 。                                  测 定 法 （通 则 0731第 一 法 ）测 定 ，即 得 。
                                                                    比 活 由 测 得 的 效 价 和 蛋 白 质 含 量 计 算 每 lm g 蛋白中
       纯 度 取 本 品 适 量 ，加 流 动 相 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中约       含门冬酰胺酶活力的单位数。
含 2 m g 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 。 照 分 子 排 阻 色 谱 法                     【类 别 】 抗 肿 瘤 药 。
(通 则 0514)测 定 ,用 适 合 分 离 分 子 量 为 10 000?500 000球状                  【贮 藏 】 遮 光 ，密 封 ，冷 处 保 存 。
蛋 白 的 色 谱 用 亲 水 改 性 硅 胶 为 填 充 剂 ；以 0. lmol/L磷 酸 盐 缓                【制 剂 】 注 射 用 门 冬 酰 胺 酶 ( 埃 希 ）
冲 液 (pH 6. 7 )(取 磷 酸 二 氢 钠 6. Og、磷 酸 氢 二 钠 20. 2g，加水
900ml,用 磷 酸 或 氢 氧 化 钠 溶 液 调 节 p H 值 至 6_ 7，加 水 至                        注射用门冬酰胺酶( 埃希）
1000ml)为 流 动 相 ；流 速 为 每 分 钟 0. 6ml;检 测 波 长 为 280nm。
取 20^1注 人 液 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 ，按 峰 面 积 归 一 化 法 计                        Zhusheyong M endongxian?anm ei (A ixi)
算 主 峰 相 对 百 分 含 量 ,应 不 得 低 于 97. 0 % 。
                                                                  Asparaginase (Escherichia) for Injection
       干 燥 失 重 取 本 品 O .lg , 置 1 0 5 1 干 燥 3 小 时 ，减 失 重 量
不 得 过 5.0% ( 通 则 0831) 。                                           本品 为 门 冬 酰胺 酶 (埃 希 )加适量稳定剂 和 赋 形 剂的 无菌
                                                             冻 干 品 。含 门 冬 酰 胺 酶 (埃 希 ）的 效 价 应 为 标 示 量 的 85.0% ?
       重 金 属 取 本 品 0. 5g,依 法 检 査 （通 则 0821第 二 法 ），含          115.0% 。
重金属不得过百万分之二十。
                                                                   【性 状 】 本 品 为 白 色 冻 干 块 状 物 或 粉 末 。
       异 常 毒 性 取 本 品 ，照 注 射 用 门 冬 酰 胺 酶 （埃 希 ）项 下 的                【鉴 别 】 （1 ) 取 本 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中含
方 法 检 査 ，应 符 合 规 定 。                                         1 0 0 0 单 位 的 溶 液 ，照 门 冬 酰 胺 酶 （埃 希 ）项 下 的 鉴 别 （1 ) 项试
                                                             验 ，应 显 相 同 的 反 应 。
       细 菌 内 毒 素 取 本 品 ，依 法 检 査 ( 通 则 1143)，每 1 单位门                 (2 )取 本 品 ，加 流 动 相 A 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中约含
冬 酰 胺 酶 ( 埃 希 ）中 含 内 毒 素 的 量 应 小 于 0. 015EU。                 100单 位 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 ，照 门 冬 酰 胺 酶 （埃 希 ）项下
                                                             的 鉴 别 (2 )项 试 验 ，应 显 相 同 结 果 。
       降 压 物 质 取 本 品 ，依 法 检 查 ( 通 则 1145),剂 量 按 猫 体 重              【检 查 】 酸 碱 度 取 本 品 1 支 ，加 水 10ml溶 解 后 ，摇 匀 ，
每 l k g 注 射 1 万 单 位 ，应 符 合 规 定 。                             依 法 测 定 （通 则 0631)，p H 值 应 为 6. 5?7. 5。
                                                                   纯 度 取 本 品 ，加 流 动 相 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中约含
      【效 价 测 定 】 酶 活 力 对 照 品 溶 液 的 制 备 取 经 105T：
干 燥 至 恒 重 的 硫 酸 铵 适 量 ，精 密 称 定 ，加 水 溶 解 并 定 量 稀 释 制
成 0. 0015mol/L的 溶 液 。

       供 试 品 溶 液 的 制 备 取 本 品 约 O .lg , 精 密 称 定 ，加 磷 酸
盐 缓 冲 液 （取 0. lm o l/ L 磷 酸 氢 二 钠 溶 液 适 量 ，用 0. lm ol/L
磷 酸 二 氢 钠 溶 液 调 节 p H 值 至 8.0)溶 解 并 定 量 稀 释 制 成 每

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