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中 国 药 典 2015年版
5ml,加 水 使 成 28ml,依 法 检 查 （通 则 0 8 2 2 第 一 法 ），应 符 合 规
定 (0. 0002% ) 。
【含 量 测 定 】 取 本 品 约 lg，精 密 称 定 ，加 水 5 m l 使 湿 润 ，
精 密 加 硫 酸 滴 定 液 (0. 5mol/L)30ml溶 解 后 ，加 甲 基 橙 指 示 液
1 滴 ，用 氢 氧 化 钠 滴 定 液 （lmol/L)滴 定 ；从 消 耗 硫 酸 滴 定 液
(0. 5mol/L)的 体 积 (ml) 中 减 去 混 有 的 氧 化 钙 应 消 耗 的 体 积
(ml),计 算 。每 l m l 硫 酸 滴 定 液 （0. 5mol/L)相 当 于 20. 15mg
的 M g O 或 28. 04 m g 的 C a O 。
【类 别 】 抗 酸 药 。
【贮 藏 】 密 封 保 存 。
重组人生长激素
Chongzu Ren Shengzhangjisu
Recombinant Human Growth Hormone
FPTIPLSRLF D NA M LRA HRL H Q LA FD TY Q E
I|
FEEA Y IPK EQ K YSFLQ NPQ T SLCFSESIPT
PSN REETQ Q K SNLELLR1SL LLIQSW LEPV
. QFLRSVFANS LVYGASDSNV YDLLKDLEEG
IQ TLM G R LED G SPR TG Q IFK Q TY SK FD TN S
I 氢 氧 化 钠 溶 液 调 节 p H 值 至 7 . 0 ，用 水 稀 释 至 500ml) 溶 解
H N D D A LLK N Y G LLY CFRK D M D KV ETFLRIV
I--------1
QCRSVEGSCG F
C 990 H 1528 N 262O 300 S7 22 125 溶 液 中 总 蛋 白 的 含 量 ，以 m g 计 。
本 品 为 重 组 技 术 生 产 的 由 191个氨基酸残基组成的蛋白
质 ，可 加 适 量 赋 形 剂 或 稳 定 剂 。每 l m g 蛋 白 中 含 重 组 人 生 长
激 素 （Cb。H 1528N262O300S7 ) 的 量 应 不 少 于 0. 91mg。
每 l m g 无 水 重 组 人 生 长 激 素 相 当 于 3. 0 单 位 。
【制 法 要 求 】 本 品 为 重 组 D N A 技 术 产 品 ，生 产 过 程 应 符
合 《人 用 重 组 D N A 技 术 产 品 总 论 》(三 部 总 论 ）的 要 求 。
【性 状 】 本 品 为 白 色 冻 干 粉 末 。
【鉴 别 】 （1 ) 取 本 品 适 量 ，加 0. 0 5 m o l / L 三 羟 甲 基 氨
基 甲 烷 缓 冲 液 （用 l m o l / L 盐 酸 溶 液 调 节 p H 值 至 7. 5 ) 溶
解 并 稀 释 制 成 每 lml中 含 重 组 人 生 长 激 素 2 m g 的 溶 液 ，
作 为 供 试 品 溶 液 ；另 取 重 组 人 生 长 激 素 对 照 品 适 量 ，同 法
制 备 ，作 为 对 照 品 溶 液 。 照 相 关 蛋 白 质 检 査 项 下 的 色 谱
条 件 试 验 ，供 试 品 溶 液 主 峰 的 保 留 时 间 应 与 对 照 品 溶 液 " 速 为 每 分 钟 0 . 5 m l ;柱 温 为 45 °C ;检 测 波 长 为 2 2 0 n m 。 取
主峰的保留时间一致。
(2)取 重 组 人 生 长 激 素 对 照 品 ，加 鉴 别 （1)项 下 的 缓 冲 液
溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 2 m g 的 溶 液 ，取 此 液 300pl、胰 蛋
白 酶 溶 液 [取 经 T P C K 处 理 的 胰 蛋 白 酶 适 量 ，加 鉴 别 （1) 项 下
的 缓 冲 液 溶 解 并 制 成 每 l m l 中 含 2 m g 的 溶 液 ] 20/xl与 鉴 别
(1)项 下 的 缓 冲 液 30(^1，混 匀 ，置 37°C水 浴 中 4 小 时 ，立 即
置 一 20°C终 止 反 应 ，作 为 对 照 品 溶 液 ；取 本 品 ，按 对 照 品 溶 液
的 方 法 制 备 ，作 为 供 试 品 溶 液 ；另 取 不 加 胰 蛋 白 酶 溶 液 的 供
试 品 溶 液 作 为 空 白 溶 液 。 照 髙 效 液 相 色 谱 法 （通 则 0512)试
重组人生长激素
验 ，用 辛 基 硅 烷 键 合 硅 胶 为 填 充 剂 （5? lOprn);以 0. 1 % 三 氟
醋 酸 溶 液 为 流 动 相 A ，以 含 0. 1 % 三 氟 醋 酸 的 90% 乙 腈 溶 液
为 流 动 相 B; 流 速 为 每 分 钟 1. 0ml;柱 温 为 35*C ;检 测 波 长 为
2 1 4 n m 。按 下 表 进 行 梯 度 洗 脱 。 取 空 白 溶 液 ，对 照 品 溶 液 和
供 试 品 溶 液 各 l o o y , 分 别 注 入 液 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 ，扣
除 空 白 溶 液 色 谱 峰 后 ，供 试 品 溶 液 的 肽 图 谱 应 与 对 照 品 溶 液
的 肽 图 谱 一 致 。.
时 间 （分 钟 ） 流动相A (% ) 流动相B(% )
0 100 0
80
20 75 20
45 50 25
70 20 50
75 80
(3)在 含 量 测 定 项 下 记 录 的 色 谱 图 中 ，供 试 品 溶 液 主 峰 的
保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
(4)取 本 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 l m g 的 溶
液 ，取 此 溶 液 9 0 0 ，加 两 性 电 解 质 10卩1 和 甲 基 红 试 液 2 0 ,混
匀 ，作 为 供 试 品 溶 液 ；另 取 重 组 人 生 长 激 素 对 照 品 ，同 法 制 备 ，
作 为 对 照 品 溶 液 。取 对 照 品 溶 液 和 供 试 品 溶 液 各 10^1，加 至
上 样 孔 ，照 等 电 聚 焦 电 泳 法 （通 则 0 5 4 1 第 六 法 ）试 验 ，供 试 品
溶液主带位置应与对照品溶液主带位置一致。
【检 查 】 总 蛋 白 取 本 品 适 量 ，精 密 称 定 ，加 磷 酸 钾 缓
冲 液 （取 磷 酸 二 氢 钾 1. 7 0 g ，加 水 4 0 0 m l 溶 解 ，用 0. lmol/L
并 定 量 稀 释 成 在 最 大 吸 收 波 长 处 （约 2 8 0 n m ) 吸 光 度 在
0. 5 ? 1. 0 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 。 照 紫 外 - 可 见 分 光 光
度 法 （通 则 0 4 0 1 ) 测 定 ，记 录 最 大 吸 收 波 长 （约 2 8 0 n m ) 和
3 2 0 n m 波 长 处 的 吸 光 度 （A max和 A 32。），按 下 式 计 算 供 试 品
总蛋白含量 — A 32O)/0* 82
式 中 V 为供试品溶液的体积。
相 关 蛋 白 质 取 本 品 适 量 ，加 鉴 别 （1 ) 项 下 的 缓 冲 液 溶
解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 重 组 人 生 长 激 素 2 m g 的 溶 液 ，作
为 供 试 品 溶 液 。 照 高 效 液 相 色 谱 法 （通 则 0512)测 定 ，用 丁
基 硅 烷 键 合 硅 胶 为 填 充 剂 （5 ? 1 0 p m ) ;以 鉴 别 （1) 项 下 的
缓 冲 液 -正 丙 醇 （71 ：2 9 ) 为 流 动 相 ，调 节 流 动 相 中 正 丙 醇
比 例 使 重 组 人 生 长 激 素 主 峰 保 留 时 间 为 3 0 ? 3 6 分 钟 ；流
系 统 适 用 性 溶 液 [取 重 组 人 生 长 激 素 对 照 品 ，加 鉴 别 （1 ) 项
下 的 缓 冲 液 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 2 m g 的 溶 液 ，过 滤
除 菌 ，室 温 放 置 2 4 小 时 ] 2(^1，注 入 液 相 色 谱 仪 ，重 组 人 生
长激素主峰与脱氨的重组人生长激素峰之间的分离度应
不 小 于 1 . 0 ，重 组 人 生 长 激 素 峰 的 拖 尾 因 子 应 为 0 . 9 ?
1 . 8 。 取 供 试 品 溶 液 20pl，注 入 液 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 ，
按 峰 面 积 归 一 化 法 计 算 ，总 相 关 蛋 白 质 不 得 大 于 6 . 0 % 。
高 分 子 蛋 白 质 取 本 品 适 量 ，照 含 量 测 定 项 下 方 法 检 查 ，
除 去 保 留 时 间 大 于 主 峰 的 其 他 峰 面 积 ，按 峰 面 积 归 一 化 法 计
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