Page 506 - 《中国药典》2015年版 第二部 - 复件(1)

中 国 药 典 2 0 1 5 年版
无 茴 取 本 品 ，用 适 宜 溶 剂 溶 解 并 稀 释 后 ，经 薄 膜 过 滤 法
处理，依 法 检 查 （通 则 1101)，应 符 合 规 定 。
其 他 应 符 合 注 射 剂 项 下 有 关 的 各 项 规 定 （通 则 0102) 。
【含量测定】 取 装 量 差 异 项 下 的 内 容 物 ，精 密 称 取 适 量 ，
照 两 性 霉 素 B 含 量 测 定 项 下 的 方 法 测 定 ，即 得 。
【类别1 同 两 性 霉 素 B 。
【规格】 （l)5m g(5000单 位 ） （2)25mg(2. 5 万 单 位 ）
(3)50mg(5 万 单 位 ）
【贮藏】 遮 光 ，密 闭 ，冷 处 保 存 。
抑肽酶
Yitaimei
Aprotinin
本 品 系 自 牛 胰 或 牛 肺 中 提 取 、纯 化 制 得 的 具 有 抑 制 蛋 白
水 解 酶 活性的多肽 。按 无 水 物 计 算 ，每 lm g 抑 肽 酶 的 活 力 不
得少于3.0单 位 。
【制法要求】 本 品 应 从 检 疫 合 格 的 牛 胰 或 肺 中 提 取 ，生
产过程应符合现行版《药 品 生 产 质 量 管 理 规 范 》的 要 求 。
【性状】 本 品 为 白 色 至 微 黄 色 粉 末 。
本 品 在 水 或 0 .9 % 氣 化 钠 溶 液 中 易 溶 ，在 乙 醇 、丙 酮 或 乙 峰 面 积 总 和 。 去 丙 氨 酸 -去 甘 氨 酸 _抑 肽 酶 的 量 不 得 大 于
醚中不溶。
【鉴别】 （1)取 本 品 与 胰 蛋 白 酶 ，分 别 加 水 溶 解 并 稀 释 制
成 每 l m i 中 含 l m g 的 溶 液 ，各 取 10^1置 点 滴 板 上 ，混 匀 后 ，加
对甲苯磺酰-L-精 氨 酸 甲 酯 盐 酸 盐 试 液 0. 2ml，放 置 数 分 钟 后 ，
应不显紫 红色 。 以 胰 蛋 白 酶 溶 液 10卜1作 对 照 ，同 法 操 作 ，应
显紫红色。
(2)在 N-焦 谷 氨 酰 -抑 肽 酶 和 有 关 物 质 项 下 记 录 的 色 谱
图中，供 试 品 溶 液 主 峰 的 保 留 时 间 应 与 对 照 品 溶 液 主 峰 的 保
留时间一致。
【检査】 吸 光 度 取 本 品 ，精 密 称 定 ，加水溶解并定 量稀 释
制成每lm l中 含 3. 0 单 位 的 溶 液 ，照紫外-可 见 分光光度法(通则
0401〉测定，在 277nm的波长处有最大吸收，吸 光 度 不 得 过 0. 8。
酸 度 取 本 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 5m g 的
溶液，依 法 测 定 ( 通 则 0631)，p H 值 应 为 5. 0? 7. 0。
溶 液 的 澄 清 度 取 本 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中
含 2mg的 溶 液 ，依 法 检 査 （通 则 0902第 一 法 ），溶 液 应 澄 清 。
离 分 子 蛋 白 质 取 本 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中
含 5 单 位 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 ；另 取 经 112T：加 热 2 小 时
处 理 过 的 抑 肽 酶 适 量 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 5 单
位的溶液，作 为 系 统 适 用 性 溶 液 。照 分 子 排 阻 色 谱 法 （通则
0514)测 定 ，以 亲 水 的 改 性 硅 胶 为 填 充 剂 （TSK-G4000SWxl
柱 ，7. 8mmX30cm，8jLtm或 其 他 适 宜 的 色 谱 柱 ），用 3 根 色 谱
柱 串 联 ；以 3m ol/L 醋 酸 溶 液 为 流 动 相 ；流 速 为 每 分 钟 1.0ml;
检 测 波 长 为 280nm;柱 温 为 35*C。取 系 统 适 用 性 溶 液 10(^1,
注 人 液 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 ，二 聚 体 峰 相 对 抑 肽 酶 峰 的 保 留
抑肽酶
时 间 约 为 0 .9 ;二 聚 体 峰 与 抑 肽 酶 峰 间 的 分 离 度 应 大 于 1.0;
抑 肽 酶 主 峰 的 拖 尾 因 子 不 得 大 于 2. 5。取 供 试 品 溶 液 100^1，
注 人 液 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 。保 留 时 间 小 于 抑 肽 酶 主 峰 的
均 为 髙 分 子 蛋 白 质 峰 ，按 峰 面 积 归 一 化 法 计 算 ，高 分 子 蛋 白 质
的 总 量 不 得 大 于 1.0% 。
去 丙 氨 酸 -去 甘 氨 酸 -抑 肽 酶 和 去 丙 氨 酸 - 抑 肽 酶 取本品
适 量 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 约 含 5 单 位 的 溶 液 ，作为
供 试 品 溶 液 ；另 取 抑 肽 酶 对 照 品 ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成 每 lml
中 含 5 单 位 的 溶 液 ，作 为 对 照 品 溶 液 。照 毛 细 管 电 泳 法 （通则
0542)测 定 ，采 用 熔 融 石 英 毛 细 管 为 分 离 柱 GSfzmX 60cm，有效
长 度 50cm);以 120mmol：/ L 磷 酸 二 氢 钾 缓 冲 液 (pH 2. 5)为操作
缓 冲 液 ;检 测 波 长 为 214nm;毛 细 管 温 度 为 30°C;操 作 电 压 为
12kV。去 丙 氨 酸 -去 甘 氨 酸 -抑 肽 酶 峰 相 对 抑 肽 酶 峰 的 迁 移 时
间 为 0. 98，去 丙 氨 酸 -抑 肽 酶 峰 相 对 抑 肽 酶 峰 的 迁 移 时 间 为
0. 99;去 丙 氨 酸 -去 甘 氨 酸 -抑 肽 酶 峰 和 去 丙 氨 酸 -抑 肽 酶 峰 间 的
分 离 度 应 大 于 ?. 8，去 丙 氨 酸 -抑 肽 酶 峰 和 抑 肽 酶 峰 间 的 分 离 度
应 大 于 0 .5 。抑 肽 酶 峰 的 拖 尾 因 子 不 得 大 于 3。
进 样 端 为 正 极 ，1 .5 k P a 压 力 进 样 ，进 样 时 间 为 3 秒 。每
次 进 样 前 ，依 次 用 0. lm o l/ L 氢 氧 化 钠 溶 液 、去 离 子 水 和 操 作
缓 冲 液 清 洗 毛 细 管 柱 2 、2 和 5 分 钟 。供 试 品 电 泳 谱 图 中 ，按
公 式 lO O C r/n )计 算 ，其 中 rt 为 去 丙 氨 酸 -去 甘 氨 酸 -抑 肽 酶 或
去 丙 氨 酸 -抑 肽 酶 的 校 正 峰 面 积 （峰 面 积 / 迁 移 时 间 ），rs 为去
丙 氨 酸 -去 甘 氨 酸 -抑 肽 酶 、去 丙 氨 酸 -抑 肽 酶 与 抑 肽 酶 的 校 正
8 .0 % ，去 丙 氨 酸 -抑 肽 酶 的 量 不 得 大 于 7 .5 % 。
N-焦 谷 氨 酰 - 抑 肽 酶 和 有 关 物 质 取 本 品 适 量 ，加 流 动 相
A 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 5 单 位 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶
液 ；另 取 抑 肽 酶 对 照 品 ，加 流 动 相 A 溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中
含 5 单 位 的 溶 液 ，作 为 对 照 品 溶 液 。照 高 效 液 相 色 谱 法 （通则
0512)测 定 ，采 用 阳 离 子 色 谱 柱 （TSK-GEL IC-Cation-SW柱 ，
7. 8mmX7. 5cm，1 0 ^ n 或 其 他 适 宜 的 色 谱 柱 ）；以 磷 酸 盐 缓 冲
液 （取 磷 酸 二 氢 钾 3. 52g、磷 酸 氢 二 钠 7. 26g，加 水 1000ml使
溶 解 ）为 流 动 相 A , 以 磷 酸 盐 -硫 酸 铵 缓 冲 液 （取 磷 酸 二 氢 钾
3.52g、磷 酸 氢 二 钠 7. 26g、硫 酸 铵 66.07g，加 水 1000ml使 溶
解 ）为 流 动 相 B ，按 下 表 进 行 梯 度 洗 脱 ；流 速 为 每 分 钟 1.0ml;
检 测 波 长 为 210nm;柱 温 为 40°C。抑 肽 酶 峰 的 保 留 时 间 约 为
17? 2 0 分 钟 ；iV-焦 谷 氨 酰 -抑 肽 酶 峰 相 对 抑 肽 酶 峰 的 保 留 时
间 为 0. 9; iV-焦 谷 氨 酰 -抑 肽 酶 峰 与 抑 肽 酶 峰 间 的 分 离 度 应 大
于 1.0;抑肽 酶峰 的拖 尾因 子 应 大于 2.0。
时间（分 钟 ） 流动相A(%) 流动相B(%)
0 72 28
30 70
21 0
30 72 100
31 72 28
40 28
取 供 试 品 溶 液 40M1，注 入 液 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 。按峰
面 积 归 一 化 法 计 算 ，iV_焦 谷 氨 酰 -抑 肽 酶 的 峰 面 积 不 得 大 于
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