Page 130 - 《中国药典》2015年版 第二部 - 复件(1)
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中国药典2 0 1 5 年 版                                               乌司他丁溶液

活力的糖蛋白。每 l m l 中 含 乌 司 他 丁 的 活 力 不 得 少 于 1 0 万                白 的 溶 液 ，加 入 等 体 积 的 供 试 品 缓 冲 液 ，混 匀 ，置 水 浴 中 5 分
单位，每 l m g 蛋 白 中 含 乌 司 他 丁 的 活 力 不 得 少 于 35 0 0               钟 ，放 冷 ，作 为 供 试 品 溶 液 ；另 取 分 子 量 标 准 品 （分 子 量 为
单位。                                                           10 0 0 0 ? 100 0 0 0标 准 蛋 白 质 ）适 量 ，加 供 试 品 缓 冲 液 使 成 每
                                                              1M 1 中 含 1/xg的 溶 液 ，置 水 浴 中 5 分 钟 ，放 冷 ，作 为 分 子 量 标 准
     【制法要求】 本 品 应 从 健 康 人 群 的 尿 中 提 取 ，生 产 过 程                品 溶 液 。照 电 泳 法 (通 则 0 5 4 1 第 五 法 还 原 型 ）测 定 ，分离胶浓
应符合现行版《药 品 生 产 质 量 管 理 规 范 》要 求 。本 品 在 生 产 过                  度 为 12. 5 % ，考 马 斯 亮 蓝 染 色 。分 子 量 应 为 37 000?43 000。
程中需经60°C加 热 1 0 小 时 ，以 使 病 毒 灭 活 。
                                                                    有 关 物 质 取 本 品 ，用 流 动 相 稀 释 制 成 每 l m l 中 约 含
     【性状】 本 品 为 无 色 至 黄 色 的 澄 清 液 体 ;无 臭 。                    10 0 0 0 单 位 的 溶 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 ；精 密 量 取 1 m l ，置 50ml
     【鉴别】 （1)取 本 品 ，用 水 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 1 0 0 0 单         量 瓶 中 ，用 流 动 相 稀 释 至 刻 度 ，摇 勻 ，作 为 对 照 溶 液 ；取供试品
位的溶液，取 0. 5 m l ，加 5 % 苯 酚 溶 液 0. 5 m l ，摇 匀 ，加 硫 酸           溶 液 适 量 ，于 105°C加 热 3 小 时 ，放 冷 ，加 入 等 体 积 的 供 试 品溶
2.5ml，摇 匀 ，溶 液 显 橙 黄 色 。                                      液 ，混 勻 ，作 为 系 统 适 用 性 溶 液 。 照 分 子 排 阻 色 谱 法 （通则
     (2)取 本 品 ，用 效 价 测 定 项 下 的 0.2m o l / L 三 乙 醇 胺 缓 冲       0 5 1 4 ) 测 定 ，以 亲 水 改 性 硅 胶 为 填 充 剂 （T S K - G E L -
液(pH 7. 8 )稀 释 制 成 每 l m l 中 含 2 0 0 单 位 的 溶 液 ，作 为 供 试       G3000SWxl,7. 8m m X 3 0 0 m m ,5jum或 其 他 适 宜 色 谱 柱 ）；以憐
品溶液。取 试 管 1 支 ，加 上 述 缓 冲 液 1.6m l 、供 试 品 溶 液                  酸 盐 缓 冲 液 (取 磷 酸 二 氢 钠 6.9 0g 、磷 酸 氢 二 钠 17. 9 1 g 及氯化
0.2ml与 效 价 测 定 项 下 的 胰 蛋 白 酶 溶 液 0.2 m l ，摇 匀 ，置 25°C         钠 8.7 7 g ，加 水 8 0 0 m l 溶 解 ，调 节 p H 值 至 6. 8 ，加 水 至
水浴保温5 分 钟 ，加 效 价 测 定 项 下 的 底 物 溶 液 1. 0 m l ，摇 匀 ，置           1000ml)为 流 动 相 ；流 速 为 每 分 钟 0. 7ml;检 测 波 长 为 2 8 0 n m 。
25°C水浴 继续 保温5 分 钟 ，溶 液 应 无 色 。另 取 试 管 1 支 ，以上                 取 系 统 适 用 性 溶 液 20y ，注 人 液 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 ，乌司
述缓冲液0.2m l 代 替 供 试 品 溶 液 ，同 法 操 作 ，溶 液 应 显 黄 色 。              他 丁 峰 与 相 邻 杂 质 峰 间 的 分 离 度 应 符 合 要 求 ，理 论 板 数 按 乌
     (3)取 本 品 ，用 水 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 2 0 0 0 单 位 的 溶 液 ，    司 他 丁 峰 计 算 不 低 于 800。精 密 量 取 供 试 品 溶 液 与 对 照 溶 液
照紫外-可 见 分 光 光 度 法 （通 则 0 4 0 1 ) 测 定 ，在 2 7 7 n m 的 波 长       各 20M 1，分 别 注 入 液 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 至 主 成 分 峰 保 留 时
处有最大吸收。                                                       间 的 2 倍 。供 试 品 溶 液 色 谱 图 中 如 有 杂 质 峰 ，各 杂 质 峰 面 积
     (4)取 本 品 ，用 0 . 9 % 氯 化 钠 溶 液 稀 释 制 成 每 l m l 中含         的 和 不 得 大 于 对 照 溶 液 主 峰 面 积 (2.0 % ) 。
500单位的溶液。用 硼 酸 - 氢 氧 化 钠 缓 冲 液 （p H 8.4)(取 硼 酸
24. 736g，加 0. l m o l / L 氢 氧 化 钠 溶 液 溶 解 并 稀 释 至 1000ml)            乙 肝 表 面 抗 原 取 本 品 ，按 试 剂 盒 说 明 书 测 定 ，应为
制备1 . 2 % 琼 脂 糖 凝 胶 板 ，照 免 疫 双 扩 散 法 （通 则 3403)检 查 ，          阴性。
应与兔抗乌司他丁血清形成明显的沉淀线。
     【检查】 酸 碱 度 取 本 品 ，用 水 稀 释 制 成 每 l m l 中含                        异 常 毒 性 取 本 品 ，用 氯 化 钠 注 射 液 稀 释 制 成 每 l m l 中
10 000单位的溶液，依 法 测定 (通 则0631)，p H 值 应 为 6. 0? 7. 5。            含 乌 司 他 丁 45 000单 位 的 溶 液 ，依 法 检 査 （通 则 1141) ，应符合
      溶 液 的 澄 清 度 与 颜 色 取 本 品 ，用 0 . 9 % 氯 化 钠 溶 液 稀          规定。
释制成每l m l 中 含 20 0 0 0 单 位 的 溶 液 ，依 法 检 査 （通 则 0901
第一法和通则0 9 0 2 第 一 法 ），溶 液 应 澄 清 无 色 ；如 显 色 ，与黄                       细 菌 内 毒 素 取 本 品 ，依 法 检 查 （通 则 1143)，每 10 000
色 1 号标准比色液比较，不 得 更 深 。                                        单 位 乌 司 他 丁 中 含 内 毒 素 的 量 应 小 于 1. 2 5 E U 。
      激 肽 原 酶 物 质 底 物 溶 液 的 制 备 取 S-2266 C相 当 于
H-D-Val-Leu-Arg-PNA ?2 H C 1 ) 2 5 m g ，加 水 溶 解 并 稀 释 制 成            凝 血 质 样 活 性 物 质 血 浆 的 制 备 取 新 鲜 兔 血 ，置预先
0. 0015mol/L的 溶 液 ，置一 18°C保 存 。                               放 有 3. 8 % 枸 橼 酸 钠 溶 液 的 容 器 (枸 橡 酸 钠 溶 液 与 血 液 容 积 之
      供 试 品 溶 液 的 制 备 取 本 品 ，用 水 稀 释 制 成 每 l m l 中约           比 为 1 : 9 ) 中 ，混 匀 ，在 2 ? 8°C条 件 下 ，以 每 分 钟 3 5 0 0 转离心
含50 000单位的溶液。                                                 2 0 分 钟 。取 上 清 液 在 一 20° C 保 存 备 用 ，用 前 在 25°C 水 浴
      测 定 法 取 试 管 2 支 ，各 精 密 加 人 供 试 品 溶 液 0. 4 m l ，再        融化。
分别加人0. 2 m o l / L 三 羟 甲 基 氨 基 甲 烷 -盐 酸 缓 冲 液 （取 三 羟
甲基氨基甲烷24. 228g，加 水 8 0 0 m r 溶 解 ，用 6 m o l / L 盐 酸 溶                测 定 法 取 本 品 ，用 巴 比 妥 缓 冲 液 （p H 7. 4 )稀 释 制 成 每
液调节p H 值 至 8 . 0 ，加 水 至 1 0 0 0 m l ) 0.5 m l ，混 匀 ，置 37°C 士  l m l 中 含 5 0 0 0 单 位 的 供 试 品 溶 液 。取 试 管 [(10? 1 2 ) m m X
0. 5°C水浴中保温5 分 钟 ，再 于 第 1 管 中 加 冰 醋 酸 溶 液 （1— 2)              7 5 m m ] 2 支 ，第 1 管 加 巴 比 妥 缓 冲 液 （p H 7.4)0. l m l 作空白对
0.1ml，第 2 管 中 加 底 物 溶 液 0. 1m l ，立 即 摇 匀 ，并 计 时 ，置            照 ，第 2 管 加 供 试 品 溶 液 0. 1m l ，分 别 加 兔 血 浆 0. 1m l ，置
37°C±0.5°C水 浴 中 准 确 反 应 3 0 分 钟 ，第 1 管 加 底 物 溶 液              25°C±0. 5°C水 浴 中 保 温 5 分 钟 ，迅 速 加 人 0. 3 7 % 氯化钙溶液
0.1ml，第 2 管 加 冰 醋 酸 溶 液 （1 — 2 )0. 1m l ，照 紫 外 -可 见 分 光       0. 1m l ，混 匀 ，计 时 。观 察 并 记 录 试 管 出 现 混 浊 （初 凝 ）的 时 间 。
光度法（通 则 0401) ，以 第 1 管 为 空 白 ，在 4 0 5 n m 的 波 长 处 测           供试品管的初凝时间应不小于空白对照管的初凝时间。
定 ，第 2 管 的 吸 光 度 不 得 过 0. 0 3 。
      分 子 量 取 本 品 适 量 ，用 水 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 2m g 蛋                【效 价 测 定 】 酶 活 力 胰 蛋 白 酶 溶 液 精 密 称 取 结 晶 胰
                                                              蛋 白 酶 （每 l m g 含 7500? 10 000 B A E E 单 位 ）适 量 ，用 冷 的 氯
                                                              化 钙 盐 酸 溶 液 （取 氯 化 钙 2. 9 4 g ，加 O . O O l m o l / L 盐 酸 溶 液
                                                              lOOOrnr溶 解 ）溶 解 并 稀 释 制 成 每 l m l 中 含 0. l m g 的 溶 液 ，临
                                                              用 新 制 ，并 置 冰 浴 保 存 。

                                                                     底 物 溶 液 取 苯 甲 酰 -L-精 氨 酸 -P-对 硝 基 苯 胺 盐 酸 盐 适

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