Page 91 - 第九版生物化学

76 第—篇 生物大分子结构与功能

CoA 还原酶的活性，减少胆固醇合成 。 甲氨蝶呤、5-氛尿瞪唗 、6-琉基嗦呤等用于治疗肿瘤也是因为它

们都是核昔酸合成途径中相关酶的竞争性抑制剂 。 免 kk y,2018 癹 kky,2018

二、酶可作为试剂用于临床检验和科学研究

（一）有些酶可作为酶偶联测定法中的指示酶或辅助酶
有些酶促反应的底物或产物含量极低，不易直接测定 。 此时，可偶联另一种或两种酶，使初始反
应产物定量地转变为另一种较易定量测定的产物，从而测定初始反应中的底物、产物或初始酶活性 。
这种方法称为酶偶联测定法 。 若偶联一种酶，这个酶即为指示酶 (indicator enzyme) ; 若偶联两种酶，
则前一种酶为辅助酶 (auxiliary enzyme) , 后一种酶为指示酶 。 例如，临床上测定血糖时，利用葡糖氧
化酶将葡萄糖 氧 化为葡萄糖酸，并释放 H202' 过 氧 化物酶催化 H202 与 4 - 氨基安替比林及苯酚反应生
成水和红色醋类化合物，测定红色醋类化合物在 505nm 处的吸光度即可计算出血糖浓度 。 此反应中
的过氧化物酶即为指示酶 。
（二）有些酶可作为酶标记测定法中的标记酶
临床上经常需检测许多微量分子，过去一般都采用放射性核素标记法。鉴千其应用不便，现今多
以酶标记代替核素标记 。 例如，酶联免疫吸附测定 (enzyme-linked immunosorbent assays, ELISA) 法就

是利用抗原－抗体特异性结合的特点，将标记酶与抗体偶联，对抗原或抗体进行检测的一种方法 岱。

常用的标记酶有辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、葡糖氧化酶 、 [3-D-半乳糖昔酶等 。
（三）多种酶成为基因工程常用的工具酶
多种酶现已常规用于基因工程操作过程中 。 例如， II 型限制性内切核酸酶、 DNA 连接酶 、 逆转录

酶、 DNA 聚合酶等 。

酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质 。 结合酶由酶蛋白和辅因子组成，只有全酶才具有
催化作用 。 同工酶是指催化相同的化学反应，但酶蛋白的分子结构 、理化 性质乃至免疫学性质不同的
一组酶 。

酶对底物具有极高的催化效率、对底物具有高度的特异性以及具有可调节性 。 酶的特异性包括
绝对特异性与相对特异性 。

酶的活性中心是酶分子中能与底物特异地结合并催化底物转变为产物的具有特定三维结构的区
域 。 活性中心内外的必需基团对于维持酶活性中心的构象是不可或缺的 。

酶催化反应时，先与底物结合形成酶－底物复合物，通过邻近效应、定向排列、表面效应使底物转
变成过渡态，并呈现多元催化作用 。

酶促反应速率受底物浓度、酶浓度、温度、 pH 、抑制剂和激活剂等影响 。 米氏方程揭示了单底物
反应的动力学特性，术氏方程的双倒数作图常用来准确求取凡和 vm旺 。 凡值等于反应速率为最大反
应速率一半时的底物浓度，在一定条件下可反映酶与底物的亲和力大小 。

三种可逆性抑制剂作用的特点：竞争性抑制剂存在时表观 Km 增大， vm虹不变；非竞争性抑制剂存

在时位不变， vm旺下降；反竞争性抑制剂存在时表观凡和 vm.. 均降低 。

别构调节是由于别构效应剂与酶的活性中心外的某个部位非共价可逆结合，而改变酶的催化活
性 。 化学修饰调节是因酶蛋白肤链上的一些基团在其他酶的催化下，与某些化学基团共价可逆结合，
而影响酶的活性 。

酶原是无活性的酶前体 。 酶原激活的实质是酶的活性中心形成或暴露的过程 。
根据酶催化的反应类型将其分为 6 大类：氧化还原酶类 、 转移酶类、水解酶类、裂合酶类、异构酶
类和连接酶类 。