Page 81 - 第九版生物化学
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66 第一篇生物大分子结构与功能
林 - 贝作图法又称双倒数作图法 。 即将米氏方程的两边同时取倒数,并加以整理 握忑线 性方程吃kky,2018
即林-贝方程:
1 凡 . 1 +1
[ SJ V
以 1/v 对 1/[ SJ 作图,纵轴上的截距为 1/Vmax' 横轴上的截距为 -1/Km( 图 3-12) 。
二、底物足够时酶浓度对酶促反应速率的影响呈直线关系
当[ s] 远远大千[ E] 时,反应中[ s] 浓度的变化量可以忽略不计 。 此时,随着酶浓度的增加,酶促
反应速率增大,两者呈现正比关系(图 3-13) 。
l-V
V
l-J 1雨 。 [E]
\`
图 3-13 酶浓度对酶促反应速率的影响
-----------
1-Km 。
图 3-12 双倒数作图法
三、温度对酶促反应速率的影响具有双重性
酶促反应时,随着反应体系温度的升高,底物分子的热运动加快,增加分子碰撞的机会,提高酶促
反应速率;但当温度升高达到一定临界值时,温度的升高可使酶变性,使酶促反应速率下降 。 大多数
酶在 60'C 时开始变性, 80'C 时多数酶的变性已不可逆 。 酶促反应速率达最大时的反应系统的温度称
为酶的最适温度 (optimum temperature) 。 反应系统的温度
低于最适温度时,温度每升高 lO'C 反应速率可增加 1. 7 - 2.0
2.5 倍。当反应温度高千最适温度时,反应速率则因酶变性
失活而降低(图 3-14) 。
酶的最适温度不是酶的特征性常数,它与反应时间有 1.5
关 。 酶在低温下活性降低,随着温度的回升酶活性逐渐恢
复 。 医学上用低温保存酶和菌种等生物制品就是利用了酶 淀华
的这一特性 。 临床上采用低温麻醉时,机体组织细胞中的 避
酶在低温下活性降低,物质代谢速率减慢,组织细胞耗氧量 l。
减少,对缺氧的耐受性升高,对机体具有保护作用 。
哺乳类动物组织中酶的最适温度多在 35 -40'C 之间 。 0.5
能在较高温度生存的生物,细胞内酶的最适反应温度亦较高 。
1969 年从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离得到一种
能在 70 -75'C 环境中生长的栖热水生菌 (Thermusaquaticus) ,
从该菌的 YTl 株中提取到的 Taq DNA 聚合酶,其最适温度 0 10 20 30 40 · 50 60
为 72'C ,95'C 时该酶的半寿期长达 40 分钟。此酶作为工具
心L 酶巳被应用于 DNA 的体外扩增 。 温度气
图 3-14 温度对酶促反应速率的影晌