Page 80 - 第九版生物化学

第三章 酶与酶促反应 65

pH 、温度和离子强度有关，而与酶浓度无关 。 各种酶的凡值是不同的，酶的凡值多在 10-6 -1.Q 孟血JI l:Okk y,2018
L 的范围（表 3 - 6) 。

表 3-6 某些 酶对其底物的 Km

酶 底物

-, ATP 一' 上 -- - -- ,;嘈一 - ' ,--- 4x10-4

已糖激酶（脑） D- 葡萄糖 5xl0 一5
D-果糖
碳酸酐酶 l.5xl0-3
HC03- 2. 6 x10-2
胰凝乳蛋白酶
甘氨酰酪氨酰甘氨酸 ＇，气 1. 08xl0-'
~ -半乳糖昔酶 N-苯甲酰酪氨酰胺 2. 5xl0-3
--- D-乳糖
过氧化氢酶 4. Ox_l0-3
溶菌酶 -'
2. 5xl0-2
-H202 6. OxlO 一3

N- 乙 酰氨基葡糖

3. 兑在一定条 件下可表示酶对底物的亲和力 米氏常数 (K"') 是单底物反应中 3 个速率常数的

综合，即 K产 k2+k3 。 已知， k3 为限速步骤的速率常数 。 当 k3 远远小于 k2 时， Km =k2lk,, 即相当于 ES 分
k,

解为 E+S 的解离常数 (dissociation constant, K,) 。 此时，凡代表酶对底物的亲和力 。 凡越大，表示酶对

底物的亲和力越小；凡越小，酶对底物的亲和力越大。但并非所有的酶促反应都是 k3 远远小千 k2' 有

时甚至 k3 远远大于 k2' 这时的凡就不能表示酶对底物的亲和力 。

4. vmax 是酶被底物完全饱和时的反应速 率 当所有的酶均与底物形成 ES 时（即[ ES] = [ E, ]) ,

反应速率达到最大，即 Vm.. =kJ E 」 。

5. 酶的转换数 当酶被底物完全饱和时 (vm..)'单位时间内每个酶分 子 （或活性中心）催化底物

转变成产物的分子数称为酶的转换数 (turnover number) , 即 k3 为酶的转换数，单位是 s 飞酶的转换数

可用来表示酶的催化效率 。 如果酶的总浓度([ E,]) 已知，便可从 vmax 计算酶的转换数 。 例如，

10-6moVL 的碳酸酐酶溶液在一秒钟内催化生成 0. 6moVL H2 C03 , 则酶的转换数 k3 为 ：

k =[-VE二,] -－ 0.6moV(L·s) = 6xl05/s
3 10-6moVL

对千生理性底物来说，大多数酶的转换数在 1 - 104/s 之间（表 3-7 ) 。

表 3-7 某些 酶的 转换数

酶 转换数 cs-1 )" ' 酶 . .:...义寸.?..',_.·.'1,,.\.1t>.;;"心心介、.、月会,..'.，..心｀，.今仁`、.' 转换数is． - 会1] ?

C 气~俨、

碳酸酐酶 .. 600 000 - - ...（肌肉）乳酸脱氢酶 200
过氧化氢酶 80 000
胰凝乳蛋白酶七.. 一 ,? ,_.一 、 100
田

乙酰胆碱酷酶 25 000 醋缩酶 11

磷鸥丙糖异构酶 4400 . ， 溶菌酶 --于一;--,, 0.5
＂淀粉酶
_ 嘈盲""

300 果糖-2 ,6-二磷酸酶 0. 1

．转换数是在酶被底物饱和的条件下测定的，受反应温度和 pH 等因素影响

（ 三 ） 兑 和 vmax 常 通 过林 五贝作图法 求取 NOTT.ta
酶促反应的 v 对[ s] 作图为矩形双曲线，从此曲线上很难准确地求得反应的凡和 vmax 。 于是，人
们对米氏方程进行种种变换，采用直线作图法准确求得凡和 vm釭，其中以林 － 贝 (Lineweaver-Burk) 作

图法最为常用 。