Page 415 - 《中国药典》2015年版 第一部 w

蕲蛇
叶扁核木 Prinsepia uniflora Batal. var. serrata Rehd. 的干
燥 成 熟 果 核 。夏 、秋 间 采 摘 成 熟 果 实 ，除 去 果 肉 ，洗 净 ，
晒干。
【性状】 本 品 呈 类 卵 圆 形 ，稍 扁 ，长 7 ? lOrnm，宽 6 ?
8 m m ，厚 3?5 m m 。表 面 淡 黄 棕 色 或 深 棕 色 ，有明显的网状沟
纹 ，间 有 棕 褐 色 果 肉 残 留 ，顶 端 尖 ，两 侧 略 不 对 称 。质 坚 硬 。
种 子 扁 平 卵 圆 形 ，种 皮 薄 ，浅 棕 色 或 红 棕 色 ，易 剥 落 ；子 叶 2,
乳 白 色 ，有 油 脂 。气 微 ，味 微 苦 。
【鉴别1 取 本 品 粉 末 2g，加 石 油 醚 （30? 60°C)30ml，超
声 处 理 3 0 分 钟 ，弃 去 石 油 醚 液 ，药 渣 再 加 石 油 醚 （30? 60°C)
30ml洗 涤 2 次 ，每 次 15ml，弃 去 石 油 醚 液 ，药 渣 挥 干 ，加无水
乙 醇 30ml，超 声 处 理 3 0 分 钟 ，滤 过 ，滤 液 蒸 干 ，残渣加无水乙
醇 l m l 使 溶 解 ，作 为 供 试 品 溶 液 。另 取 熊 果 酸 对 照 品 ，加无水
乙 醇 制 成 每 l m l 含 0 . 2 m g 的 溶 液 ，作 为 对 照 品 溶 液 。照薄层
色 谱 法 (通 则 0502)试 验 ，吸取上述两种溶液各4?8fJ，分别点
于 同 一 硅 胶 G 薄 层 板 上 ，以石油醚（30?60°C)-丙 酮 （5 : 2)为
展 开 剂 ，展 开 ，取 出 ，晾 干 ，喷 以 1 0 % 硫 酸 乙 醇 溶 液 ，在 100°C
加 热 至 斑 点 显 色 清 晰 ，分 别 置 日 光 和 紫 外 光 灯 （365mn)下检
视 。供 试 品 色 谱 中 ，在 与 对 照 品 色 谱 相 应 的 位 置 上 ，显相同颜
色的斑点或荧光斑点。
【检查】 水 分 不 得 过 1 1 . 0 % (通 则 08犯 第 二 法 ）。
饮片
【炮制】 除 去 杂 质 ，洗 净 ，干 燥 。用 时 捣 碎 。
【性状】 【鉴别】 【检查】 同 药 材 。
【性味与归经】 甘 ，微 寒 。归 肝 经 。
【功能与主治】 疏 风 散 热 ，养 肝 明 目 。用 于 目 赤 肿 痛 ，睑
弦 赤 烂 ，目暗羞明。
【用法与用量】 5?9g。
【贮藏】 置 干 燥 处 。
蕲蛇
Qishe
AGKISTRODON
本 品 为 鐘 科 动 物 五 步 蛇 Agkistrodon acutus (Guenther) 样 量 为 2#(0. 5Mg/^l)。电 泳 结 束 后 ，取凝胶片在凝胶成像仪
的干 燥 体 。多 于 夏 、秋 二 季 捕 捉 ，剖 开 蛇 腹 ，除 去 内 脏 ，洗 净 ，
用 竹 片 撑 开 腹 部 ，盘 成 圆 盘 状 ，干 燥 后 拆 除 竹 片 。
【性状】 本 品 卷 呈 圆 盘 状 ，盘 径 17? 34cm，体 长 可 达
2 m 。头 在 中 间 稍 向 上 ，呈 三 角 形 而 扁 平 ，吻 端 向 上 ，习 称 “翘
鼻头”。上 腭 有 管 状 毒 牙 ，中 空 尖 锐 。背部两侧各有黑褐色与
浅 棕 色 组 成 的 “V ”形 斑 纹 17?2 5 个 ，其 “V ”形 的 两 上 端 在 背
中 线 上 相 接 ，习 称 “方 胜 纹 ”，有 的 左 右 不 相 接 ，呈 交 错 排 列 。
腹 部 撑 开 或 不 撑 开 ，灰 白 色 ，鳞 片 较 大 ，有 黑 色 类 圆 形 的 斑 点 ，
习称“连珠斑”;腹 内 壁 黄 白 色 ，脊 椎 骨 的 棘 突 较 高 ，呈刀片状
上 突 ，前 后 椎 体 下 突 基 本 同 形 ，多 为 弯 刀 状 ，向 后 倾 斜 ，尖端明
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中 国 药 典 2015年版
显 超 过 椎 体 后 隆 面 。尾 部 骤 细 ，末 端 有 三 角 形 深 灰 色 的 角 质
鳞 片 1 枚 。气 腥 ，味 微 咸 。
【浸出物】 照 醇 溶 性 浸 出 物 测 定 法 （通 则 2201)项下的
热 浸 法 测 定 ，用 稀 乙 醇 作 溶 剂 ，不 得 少 于 10.0% 。
饮片
【炮制】 蕲 蛇 去 头 、鱗 ，切 成 寸 段 。
蕲 蛇 肉 去 头 ，用 黄 酒 润 透 后 ，除 去 鳞 、骨 ，干 燥 。
酒 蕲 蛇 取 净 蕲 蛇 段 ，照 酒 炙 法 （通 则 0213)炒 干 。
每 100kg蕲 蛇 ，用 黄 酒 20kg。
本 品 为 段 状 。棕 褐 色 或 黑 色 ，略 有 酒 气 。
【鉴别】 聚 合酶 链 式 反 应 法 。
模 板 D N A 提 取 取 本 品 0 . 5 g ，置 乳 钵 中 ，加 液 氮 适 量 ，
充 分 研 磨 使 成 粉 末 ，取 O . l g ，置 1 . 5 m l 离 心 管 中 ，加人消化液
275m1[细 胞 核 裂 解 液 2 0 0 ^ 1 ,0 . 5 m o l / L 乙 二 胺 四 醋 酸 二 钠 溶
液 5 0 M1，蛋白酶 K ( 2 0 m g / m l ) 2 0 f x l ，R N A 酶溶液 5 fx l] ，在 55°C
水 浴 保 温 1 小 时 ，加 人 裂 解 缓 冲 液 250^1，混 匀 ，加 到 D N A 纯
化 柱 中 ，离 心 （转 速 为 每 分 钟 10 0 0 0 转 ）3 分 钟 ；弃 去 过 滤 液 ，
加 入 洗 脱 液 S O O ^ S m o l / L 醋 酸 钾 溶 液 26mU l m o l / L T r i s - 盐
酸 溶 液 （p H 7 . 5)18M1 ,0 . 5 m o l / L 乙 二 胺 四 醋 酸 二 钠 溶 液
( p H 8 . 0 ) 3 0 ，无 水 乙 醇 48(^1，灭 菌 双 蒸 水 273/xl]，离 心 （转速
为 每 分 钟 10 000转 ）1 分 钟 ；弃 去 过 滤 液 ，用 上 述 洗 脱 液 反 复
洗 脱 3 次 ，每 次 离 心 （转 速 为 每 分 钟 10 000转 ）1 分钟;弃去过
滤 液 ，再 离 心 2 分 钟 ，将 D N A 纯 化 柱 转 移 人 另 一 离 心 管 中 ，
加 入 无 菌 双 蒸 水 lOOpl，室 温 放 置 2 分 钟 后 ，离 心 （转速为每分
钟 10 000转 ）2 分 钟 ，取 上 清 液 ，作 为 供 试 品 溶 液 ，置 零 下
2 0 ° C 保 存 备 用 。另 取 蕲 蛇 对 照 药 材 0. 5g，同 法制 成 对 照 药 材
模板 D N A 溶液。
PCR反 应 鉴别引物：5 ' G G C A A T T C A C T A C A C A G C C A A -
C A ^ C A A C T 3 , 和 5' C C A T A G T C A G G T G G T T A G T G A T A C 3、
P C R 反应体系：在 2 0 0 4 离 心 管 中 进 行 ，反 应 总 体 积 为 25m1，
反 应 体系包括 1 0 X P C R 缓 冲 液 2. 5jul，dNTP(2. 5mmol/L)
2M1，鉴 别 引 物 （10Mmol/L)各 0. 5M1，高 保 真 Taq D N A 聚合酶
(5U/m1)0. 2^x1，模 板 0. 5士 无 菌 双 蒸 水 18. 8^1。将 离 心 管 置
P C R 仪 ，P C R 反 应 参 数 ：95°C预 变 性 5 分 钟 ，循 环 反 应 3 0 次
(95°C30 秒 ，63°C45 秒 ），延 伸 （72°C)5 分 钟 。
电 泳 检 测 照 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 法 方 法 2(通 则 0541) ，胶
浓 度 为 1 % ，胶 中 加 入 核 酸 凝 胶 染 色 剂 GelRed;供试品与对照
药 材 P C R 反 应 溶 液 的 上 样 量 分 别 为 8M1，D N A 分子量标记上
上 或 紫 外 透 射 仪 上 检 视 。供 试 品 凝 胶 电 泳 图 谱 中 ，在与对照
药 材 凝 胶 电 泳 图 谱 相 应 的 位 置 上 ，在 300? 400bp应 有 单 一
D N A 条带。
【性味与归经】 甘 、咸 ，温 ;有 毒 。归 肝 经 。
【功能与主治】 祛 风 ，通 络 ，止 痉 。用 于 风 湿 顽 痹 ，麻木
拘 挛 ，中 风 口 眼 喁 斜 ，半 身 不 遂 ，抽 搐 痉 挛 ，破 伤 风 ，麻 风 ，
疥癣。
【用法与用霣】 3 ? 9 g ; 研 末 吞 服 ，一 次 1 ? 1. 5 g ，一日